尺寸排阻色譜柱是一種廣泛應用于生物分析領域的工具，其工作原理主要基于分子大小差異進行分離。利用柱內固定相中孔隙與分子間的物理作用來實現(xiàn)分離。具體來說，聚合物分子在柱子中的孔道中被篩選，較大的分子無法通過尺寸較小的孔道，只有較小的分子才能通過這些孔道，從而實現(xiàn)不同分子尺寸的分離。

　　使用尺寸排阻色譜柱時，需要注意以下幾個關鍵事項：

　　1、流動相的選擇：流動相應根據(jù)樣品的溶解性來選擇，它應與凝膠本身具有相似性，同時要求黏度低，與樣品的折光率有較大差異。這樣可以確保流動相能夠潤濕凝膠并防止吸附作用的發(fā)生。

　　2、進樣量控制：對于體積排阻色譜來說，進樣量不宜超過柱體積的5%。例如，一根規(guī)格為300 x 7.8mm的色譜柱的柱體積約為14mL，因此進樣量不應超過700uL?？刂七m當?shù)倪M樣量是保證分離效果和避免柱子過載的重要條件。

　　3、樣品的準備：在注入樣品之前，需要確保樣品已經(jīng)被適當?shù)厝芙獠⑶疫^濾，以避免固體顆?；蛭慈芙獾奈镔|對色譜柱造成損害。

　　4、溫度的控制：尺寸排阻色譜通常需要在恒溫條件下進行，以保持色譜柱的穩(wěn)定性和提高分離效率。

　　5、色譜柱的維護：使用后應及時清洗色譜柱，以去除殘留的樣品和流動相，防止柱內發(fā)生堵塞或微生物生長。

　　6、系統(tǒng)監(jiān)測：在操作過程中，應密切監(jiān)控系統(tǒng)壓力和檢測器響應，以便及時發(fā)現(xiàn)任何異常情況并采取相應措施。

　　綜上所述，通過遵循這些注意事項，可以確保尺寸排阻色譜柱的有效使用，同時也能延長其使用壽命，獲得可靠的分析結果。在進行實驗前，還應仔細閱讀色譜柱的使用說明書，以了解更詳細的操作指南和建議。